中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告

第 692 號

依據(jù)《飼料和飼料添加劑管理條例》 、《 新飼料和新飼料添加

劑管理辦法》 ,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部組織全國飼料評審委員會對申請人提交

的新飼料和新飼料添加劑產(chǎn)品申請材料進行了評審,決定批準馬

克斯克魯維酵母( CGMCC 10621) 和紅三葉草提取物(有效成分為

刺芒柄花素、鷹嘴豆芽素 A) 為新飼料添加劑,對部分飼料添加劑

品種擴大適用范圍,并對《飼料原料目錄》 進行增補和修訂。 現(xiàn)將

有關(guān)事項公告如下。

一、批準 2 個新飼料添加劑品種

批準復(fù)旦大學(xué)、武漢新華揚生物股份有限公司聯(lián)合申請的馬

克斯克魯維酵母( CGMCC 10621) ,中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)

研究所、湖南菲托葳植物資源有限公司、中優(yōu)乳奶業(yè)研究院( 天

津)有限公司聯(lián)合申請的紅三葉草提取物( 有效成分為刺芒柄花

素、鷹嘴豆芽素 A) 為新飼料添加劑,并準許在中華人民共和國境

內(nèi)生產(chǎn)、經(jīng)營和使用,核發(fā)飼料和飼料添加劑新產(chǎn)品證書(新產(chǎn)品

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目錄見附件 1) ,同時發(fā)布產(chǎn)品標準(含說明書和標簽,見附件 2、

3) 。 產(chǎn)品標準、說明書、標簽和檢測方法標準自發(fā)布之日起執(zhí)行。

產(chǎn)品的監(jiān)測期自發(fā)布之日起至 2028 年 7 月底,生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)當(dāng)收集

產(chǎn)品的質(zhì)量穩(wěn)定性及其對動物產(chǎn)品質(zhì)量安全的影響等信息,監(jiān)測

期結(jié)束后向農(nóng)業(yè)農(nóng)村部報告。

二、增補 4 種飼料原料進入《飼料原料目錄》

(一)增補等鞭金藻粉進入《 飼料原料目錄》 ( 《 飼料原料目

錄》修訂列表見附件 4) ,編號:7． 5． 11,特征描述:以天然等鞭金藻

( Isochrysis sp． )種為原料,以尿素為氮源,在光生物反應(yīng)器中培養(yǎng),

濃縮獲得藻膏,經(jīng)干燥、粉碎形成的藻粉。 產(chǎn)品中真蛋白含量不低

于 35% ,粗灰分不高于 15% ,尿素殘留不高于 0． 5% ,微囊藻毒素

不得檢出。 該產(chǎn)品僅限于水產(chǎn)飼料使用。 強制性標識要求:真蛋

白、粗脂肪、粗灰分、水分、尿素。 該飼料原料按照單一飼料品種

管理。

(二)增補褐指藻粉進入《 飼料原料目錄》 ( 《 飼料原料目錄》

修訂列表見附件 4) ,編號:7． 5． 12,特征描述:以天然褐指藻(Phaeodactylum sp． )種為原料,以尿素為氮源,經(jīng)藻種在光生物反應(yīng)器培

養(yǎng),濃縮獲得藻膏,經(jīng)干燥、粉碎形成的藻粉。 產(chǎn)品中真蛋白含量

不低于 30% ,粗灰分不高于 15% ,尿素殘留不高于 0． 5% ,微囊藻

毒素不得檢出。 該產(chǎn)品僅限于水產(chǎn)飼料使用。 強制性標識要求:

真蛋白、粗脂肪、粗灰分、水分、尿素。 該飼料原料按照單一飼料品

種管理。

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(三)增補四爿藻粉進入《飼料原料目錄》 (《飼料原料目錄》修訂

列表見附件 4),編號:7． 5． 13,特征描述:以天然四爿藻(Tetraselmis sp． )

為原料,以尿素為氮源,在光生物反應(yīng)器中培養(yǎng),濃縮獲得藻膏,經(jīng)干

燥、粉碎形成的藻粉。 產(chǎn)品中真蛋白含量不低于 30% ,粗灰分不高于

15% ,尿素殘留不高于 0． 5% ,微囊藻毒素不得檢出。 該產(chǎn)品僅限于水

產(chǎn)飼料使用。 強制性標識要求:真蛋白、粗脂肪、粗灰分、水分、尿素。

該飼料原料按照單一飼料品種管理。

(四)增補酪蛋白酸鈣進入《 飼料原料目錄》 ( 《 飼料原料目

錄》修訂列表見附件 4) ,編號:8． 2． 3,特征描述:以脫脂乳為原料,

制成酪蛋白后與氫氧化鈣或碳酸鈣等中和,再經(jīng)干燥獲得的產(chǎn)品。

產(chǎn)品中蛋白質(zhì)含量不低于 88% ,鈣含量不低于 1． 15% 。 強制性標

識要求:蛋白質(zhì)、鈣。

三、擴大飼料原料乙醇梭菌蛋白和飼料添加劑蛋氨酸鉻的適

用范圍

(一)將乙醇梭菌蛋白適用范圍擴大至仔豬和肉禽,在仔豬和

肉禽配合飼料中的推薦使用量為 1% ~ 4% ,最高不超過 9% (以干

物質(zhì)含量為 88% 的配合飼料為基礎(chǔ)) 。

(二)將蛋氨酸鉻適用范圍擴大至泌乳奶牛(產(chǎn)品信息表見附

件 5) ,在泌乳奶牛全混合日糧中的推薦添加量為 4 ~ 8 mg / 頭 / 天

或 0． 16 ~ 0． 32 mg / kg(以干物質(zhì)含量為 88% 的全混合日糧為基礎(chǔ),

以鉻元素計) ,最高限量(指有機形態(tài)鉻的添加限量) 為 8 mg / 頭 /

天或 0． 32 mg / kg(以干物質(zhì)含量為 88% 的全混合日糧為基礎(chǔ),以鉻

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元素計) 。

四、將《飼料原料目錄》中“9． 4． 5 雞蛋”修訂為“9． 4． 5 蛋”

將《飼 料 原 料 目 錄》 中 “ 9． 4． 5 雞 蛋” 修 訂 為 “ 9． 4． 5 蛋”

( 《飼料原料目錄》修訂列表見附件 4) ,特征描述修訂為:未經(jīng)過加

工或僅經(jīng)冷藏、涂膜等保鮮技術(shù)處理的可食用禽蛋,有殼或去殼。

產(chǎn)品名稱需標明具體動物種類,如雞蛋、鴨蛋、鵪鶉蛋。 強制性標

識要求:粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分(適用于有殼蛋) 。

五、增補飼料添加劑 L-抗壞血酸到《飼料添加劑品種目錄》的

“抗氧化劑”類中,適用范圍為養(yǎng)殖動物。

特此公告。

附件:1． 飼料和飼料添加劑新產(chǎn)品目錄

2． 《飼料添加劑 馬克斯克魯維酵母(CGMCC 10621) 》產(chǎn)

品標準

3． 《飼料添加劑 紅三葉草提取物(有效成分為刺芒柄花

素、鷹嘴豆芽素 A) 》產(chǎn)品標準

4． 《飼料原料目錄》修訂列表

5． 飼料和飼料添加劑產(chǎn)品目錄

農(nóng)業(yè)農(nóng)村部

2023 年 7 月 21 日

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飼料和飼料添加劑新產(chǎn)品目錄

證書編號 2023–02

申請單位

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所，湖南菲托葳植物

資源有限公司，中優(yōu)乳奶業(yè)研究院（天津）有限公司

通用名稱

紅三葉草提取物（有效成分為刺芒柄花素、鷹嘴豆芽素

A）

英文名稱

Red clover extracts (Active substances: Formononetin ，

Biochanin A)

主要成分 刺芒柄花素、鷹嘴豆芽素 A

產(chǎn)品類別 植物提取物類飼料添加劑

產(chǎn)品來源

以紅三葉草為原料，經(jīng)乙醇提取、濃縮、脫脂、精制、

沉淀等工藝制得

適用動物 成年奶牛和育成期奶牛

在全混合日

糧中的推薦

添加量（以

干物質(zhì)含量

為 88%的全

混合日糧為

基礎(chǔ)）

0.4～0.8 g/kg （以刺芒柄花素與鷹嘴豆芽素 A 之和計）

質(zhì)量要求

外觀和性狀 棕綠色粉末，氣微，味

略苦

刺芒柄花素/% ≥15.0

鷹嘴豆芽素 A/% ≥5.0

粒度（0.25mm 孔徑試驗篩通

過率）/% ≥90

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水分/% ≤5.0

灼燒殘渣/% ≤10.0

總砷（以 As 計）/（mg/kg） ≤2.0

鉛（Pb）/（mg/kg） ≤2.0

正己烷/% ≤0.029

乙酸乙酯/% ≤0.5

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附件 3

NYSL

新飼料和新飼料添加劑產(chǎn)品標準

NYSL―1002―2023

飼料添加劑 紅三葉草提取物

（有效成分為刺芒柄花素、

鷹嘴豆芽素 A）

Feed Additive — Red Clover Extract

(Active substances: Formononetin, Biochanin A)

2023-07-21 發(fā)布 2023-07-21 實施

中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部 發(fā)布

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NYSL―1001―2023

前??言

本文件按照 GB/T 1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則 第 1 部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起

草規(guī)則》的規(guī)定起草。

本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。

本文件由中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜牧獸醫(yī)局提出，由全國飼料評審委員會歸口。

本文件由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所、湖南菲托葳植物資源有限公司和中

優(yōu)乳奶業(yè)研究院（天津）有限公司起草，由國家飼料質(zhì)量檢驗檢測中心（北京）復(fù)核。

本文件主要起草人：王加啟、趙圣國、鄭楠、唐昭山、曾誠、蘆強、彭旋、李長虹、

鄭文、屈雪寅。

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NYSL―1002―2023

飼料添加劑 紅三葉草提取物（有效成分為刺芒柄花素、鷹

嘴豆芽素 A）

1 范圍

本文件規(guī)定了飼料添加劑紅三葉草提取物（有效成分為刺芒柄花素、鷹嘴豆芽素A）的

技術(shù)要求、取樣、試驗方法、檢驗規(guī)則、標簽、包裝、運輸、貯存和保質(zhì)期，描述了取樣和

試驗方法。

本文件適用于以紅三葉草為原料，經(jīng)醇提、濃縮、脫脂、精制、沉淀和干燥，與適宜載

體混合制得的以刺芒柄花素和鷹嘴豆芽素A為有效成分的飼料添加劑紅三葉草提取物。

2 規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期

的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括

所有的修改單）適用于本文件。

GB/T 602 化學(xué)試劑 雜質(zhì)測定用標準溶液的制備

GB/T 603 化學(xué)試劑 試驗方法中所用制劑及制品的制備

GB/T 5917.1 飼料粉碎粒度測定 兩層篩篩分法

GB/T 6435 飼料中水分的測定

GB/T 6438 飼料中粗灰分的測定

GB/T 6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

GB/T 8170 數(shù)值修約規(guī)則與極限數(shù)值的表示和判定

GB 10648 飼料標簽

GB/T 13079 飼料中總砷的測定

GB/T 13080 飼料中鉛的測定 原子吸收光譜法

GB/T 14699.1 飼料 采樣

3 術(shù)語和定義

本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。

4 化學(xué)名稱、分子式、相對分子質(zhì)量、CAS 登記號和結(jié)構(gòu)式

刺芒柄花素

化學(xué)名稱：7-羥基-4-甲氧基異黃酮

分子式：C16H12O4

相對分子質(zhì)量：268.26（按照 2016 年國際相對原子質(zhì)量）

CAS 登記號：485-72-3

結(jié)構(gòu)式：刺芒柄花素的結(jié)構(gòu)式見圖 1。

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NYSL―1002―2023

圖1 刺芒柄花素的結(jié)構(gòu)式

4.1 鷹嘴豆芽素 A

化學(xué)名稱：5,7-二羥基-4-甲氧基異黃酮

分子式：C16H12O5

相對分子質(zhì)量：284.26（按照2016年國際相對原子質(zhì)量）

CAS登記號：491-80-5

結(jié)構(gòu)式：鷹嘴豆芽素A的結(jié)構(gòu)式見圖2。

圖2 鷹嘴豆芽素A的結(jié)構(gòu)式

5 技術(shù)要求

5.1 外觀與性狀

棕綠色粉末，氣微，味略苦。

5.2 鑒別

應(yīng)符合表 1 的要求。

表 1 鑒別指標

項 目 指 標

薄層色譜法鑒別 熒光斑點的位置和顏色應(yīng)與刺芒柄花素和鷹嘴

豆芽素 A 標準溶液熒光斑點的位置和顏色相同

高效液相色譜法

鑒別

特征峰數(shù) 4 個

特征峰相對保留

時間

峰 1（0.708）

峰 2（0.886）

峰 3（1.000）

峰 4（1.141）

±5％以內(nèi)

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NYSL―1002―2023

5.3 理化指標

應(yīng)符合表 2 的要求。

表 2 理化指標

項 目 指 標

刺芒柄花素/％ ≥15.0

鷹嘴豆芽素 A/％ ≥5.0

粒度（0.25 mm 孔徑試驗篩通過率）/％ ≥90

水分/％ ≤5.0

灼燒殘渣/％ ≤10.0

總砷（以 As 計）/（mg/kg） ≤2.0

鉛（Pb）/（mg/kg） ≤2.0

正己烷/％ ≤0.029

乙酸乙酯/％ ≤0.5

6 取樣

按GB/T 14699.1的規(guī)定執(zhí)行。

7 試驗方法

本文件所用試劑和水，在沒有注明其他要求時，均指分析純試劑和 GB/T 6682 中規(guī)定

的三級水；試驗中所用標準溶液、制劑及制品，在沒有注明其他要求時，均按 GB/T 602、

GB/T 603 的規(guī)定制備。試驗中所用溶液在未注明用何種溶劑配制時，均指水溶液。

7.1 外觀與性狀

取適量試樣放置于清潔、干燥的白色背景下，于自然光線下用眼觀其色澤和狀態(tài)，嗅氣

味，嘗味道。

7.2 鑒別試驗

按附錄 A 規(guī)定執(zhí)行。

7.3 刺芒柄花素、鷹嘴豆芽素 A

按附錄 B 規(guī)定執(zhí)行。

7.4 粒度

按 GB/T 5917.1 規(guī)定執(zhí)行。

7.5 水分

按 GB/T 6435 規(guī)定執(zhí)行。

7.6 灼燒殘渣

按 GB/T 6438 規(guī)定執(zhí)行。

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NYSL―1002―2023

7.7 總砷

按 GB/T 13079 規(guī)定執(zhí)行。

7.8 鉛

按GB/T 13080規(guī)定執(zhí)行。

7.9 正己烷、乙酸乙酯

按附錄C規(guī)定執(zhí)行。

8 檢驗規(guī)則

8.1 組批

以相同材料、相同生產(chǎn)工藝、連續(xù)生產(chǎn)或同一班次生產(chǎn)的同一規(guī)格的產(chǎn)品為一批。

8.2 出廠檢驗

出廠檢驗項目為外觀與性狀、粒度、水分、刺芒柄花素和鷹嘴豆芽素 A 含量。產(chǎn)品出

廠前應(yīng)逐批檢驗，檢驗合格并且附具合格證和產(chǎn)品使用說明書（見附錄 D）方可出廠。

8.3 型式檢驗

型式檢驗項目為第5章規(guī)定的所有項目。在正常生產(chǎn)情況下，每半年至少進行1次型式檢

驗。有下列情況之一時，亦應(yīng)進行型式檢驗：

a）產(chǎn)品定型投產(chǎn)時；

b）生產(chǎn)工藝、配方或主要原料來源有較大改變，可能影響產(chǎn)品質(zhì)量時；

c）停產(chǎn)3個月以上，重新恢復(fù)生產(chǎn)時；

d）出廠檢驗結(jié)果與上次型式檢驗結(jié)果有較大差異時；

e）飼料管理部門提出檢驗要求時。

8.4 判定規(guī)則

8.4.1 所驗項目全部合格，判定為該批次產(chǎn)品合格。

8.4.2 檢驗結(jié)果中有任何指標不符合本文件規(guī)定時，可自同批產(chǎn)品中重新加倍取樣進行復(fù)檢。

復(fù)檢結(jié)果有一項指標不符合本文件規(guī)定，則判定該批產(chǎn)品不合格。

8.4.3 各項目指標的極限數(shù)值判定按GB/T 8170中修約值比較法執(zhí)行。

9 標簽、包裝、運輸、貯存和保質(zhì)期

9.1 標簽

按 GB 10648 規(guī)定執(zhí)行，見附錄 E。

9.2 包裝

采用鋁箔袋進行包裝。

9.3 運輸

運輸中防止包裝破損、日曬、雨淋、受潮，禁止與有毒有害物質(zhì)混運。

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NYSL―1002―2023

9.4 貯存

貯存時防止日曬、雨淋、受潮，禁止與有毒有害物質(zhì)混儲。

9.5 保質(zhì)期

未開啟包裝的產(chǎn)品，在規(guī)定的運輸、貯存條件下，原包裝自生產(chǎn)之日起保質(zhì)期為 2 年。

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NYSL―1002―2023

附錄 A

（規(guī)范性）

鑒別試驗

A.1 薄層色譜法鑒別

A.1.1 試劑或材料

A.1.1.1 甲醇。

A.1.1.2 三氯甲烷。

A.1.1.3 冰醋酸。

A.1.1.4 刺芒柄花素標準溶液（0.25 mg/mL）：稱取 25 mg（精確至 0.01 mg）刺芒柄花

素標準品（CAS 號：485-72-3，純度不低于 98.0％）于 100 mL 容量瓶中，用甲醇（A.1.1.1）

溶解并定容，搖勻。

A.1.1.5 鷹嘴豆芽素 A 標準溶液（0.1 mg/mL）：稱取 20 mg（精確至 0.01 mg）鷹嘴豆芽

素 A 標準品（CAS 號：491-80-5，純度不低于 98.0％）于 200 mL 容量瓶中，用甲醇（A.1.1.1）

溶解并定容，搖勻。

A.1.1.6 薄層板：硅膠 gF254。

A.1.1.7 展開劑：三氯甲烷（A.1.1.2）+甲醇（A.1.1.1）+冰醋酸（A.1.1.3）=100+1+0.2

（體積分數(shù)）。

A.1.2 儀器設(shè)備

A.1.2.1 分析天平：精度為 0.1 g、0.01 mg。

A.1.2.2 紫外分析儀：暗箱式，波長 254 nm。

A.1.3 試驗步驟

稱取 0.1 g 試樣，加 100 mL 甲醇（A.1.1.1），超聲 30 min，靜置，取上清液備用。

取標準溶液（A.1.1.4 和 A.1.1.5）及試樣溶液各 2 μL，分別點于同一薄層板（A.1.1.6）

上，用展開劑（A.1.1.7）展開，取出，晾干；置紫外分析儀（A.1.2.2）中，在 254 nm

波長下檢視。

試樣溶液熒光斑點的位置和顏色應(yīng)與刺芒柄花素標準溶液（A.1.1.4）和鷹嘴豆芽素 A

標準溶液（A.1.1.5）熒光斑點的位置和顏色相同。

A.2 高效液相色譜法鑒別

A.2.1 試劑或材料

A.2.1.1 乙腈：色譜純。

A.2.1.2 磷酸。

A.2.1.3 甲醇：色譜純。

A.2.1.4 磷酸溶液（0.1％）：取 1 mL 磷酸（A.2.1.2），用水定容至 1 L 容量瓶中，搖勻，

過濾。

A.2.1.5 刺芒柄花素標準溶液（0.5 mg/mL）：稱取 25 mg（精確至 0.01 mg）刺芒柄花素

標準品（CAS 號：485-72-3，純度不低于 98.0％）于 50 mL 容量瓶中，加甲醇（A.2.1.3）

超聲溶解并定容，搖勻。

A.2.1.6 鷹嘴豆芽素 A 標準溶液（0.5 mg/mL）：稱取 25 mg（精確至 0.01 mg）鷹嘴豆芽

素 A 標準品（CAS 號：491-80-5，純度不低于 98.0％）于 50 mL 容量瓶中，加甲醇（A.2.1.3）

超聲溶解并定容，搖勻。

A.2.1.7 大豆苷元標準溶液（0.5 mg/mL）：稱取 25 mg（精確至 0.01 mg）大豆苷元標準

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NYSL―1002―2023

品（CAS 號：486-66-8，純度不低于 98.0％）于 50 mL 容量瓶中，加甲醇（A.2.1.3）超

聲溶解并定容，搖勻。

A.2.1.8 染料木素標準溶液（0.5 mg/mL）：稱取 25 mg（精確至 0.01 mg）染料木素標準

品（CAS 號：446-72-0，純度不低于 98.0％）于 50 mL 容量瓶中，加甲醇（A.2.1.3）超

聲溶解并定容，搖勻。

A.2.1.9 混合標準溶液：準確量取 10 mL 刺芒柄花素標準溶液（A.2.1.5）、10 mL 鷹嘴豆

芽素 A 標準溶液（A.2.1.6）、10 mL 大豆苷元標準溶液（A.2.1.7）和 10 mL 染料木素標

準溶液（A.2.1.8），置于 50 mL 容量瓶中，搖勻，用甲醇（A.2.1.3）定容，配制成刺芒

柄花素、鷹嘴豆芽素 A、大豆苷元和染料木素質(zhì)量濃度均為 0.1 mg/mL 的混合標準溶液。

A.2.1.10 微孔濾膜：0.45 μm，有機系。

A.2.2 儀器設(shè)備

A.2.2.1 高效液相色譜儀：配二極管陣列檢測器。

A.2.2.2 分析天平：精度為 0.01 mg。

A.2.2.3 超聲波清洗器。

A.2.3 試驗步驟

A.2.3.1 試樣溶液制備

稱取試樣 0.05 g（精確至 0.1 mg）于 100 mL 具塞三角瓶中，加 50 mL 甲醇（A.2.1.3）

后旋搖混合，超聲 10 min，靜置后取上清液，用微孔濾膜（A.2.1.10）過濾。

A.2.3.2 測定

A.2.3.2.1 液相色譜參考條件

液相色譜參考條件如下：

a）色譜柱：C18柱，柱長為 250 mm，內(nèi)徑為 4.6 mm，粒徑為 5 μm，或性能相當(dāng)者；

b）流動相：A 相為乙腈（A.2.1.1），B 相為磷酸溶液（A.2.1.4）；梯度洗脫程序見表

A.1；

c）流速：0.8 mL/min；

d）柱溫：30 ℃；

e）檢測波長：260 nm；

f）進樣量：10 μL。

表 A.1 梯度洗脫程序

時間（min） 流動相 A（％） 流動相 B（％）

0 15 85

20 45 55

30 75 25

31 90 10

35 90 10

36 15 85

40 15 85

A.2.3.2.2 試樣溶液和標準溶液測定

在儀器的最佳條件下，分別取試樣溶液（A.2.3.1）和標準溶液（A.2.1.5、A.2.1.6、

A.2.1.7、A.2.1.8、A.2.1.9），上機測定。

A.2.4 測定結(jié)果

— 29 —

NYSL―1002―2023

試樣溶液高效液相色譜圖（見圖 A.1）中應(yīng)呈現(xiàn) 4 個特征峰，并與混合標準溶液高效液

相色譜圖（見圖 A.2）中 4 個特征峰相對應(yīng)，將峰 3（刺芒柄花素）標定為 S 峰。分別計算

試樣溶液和混合標準溶液色譜圖中峰 1（大豆苷元）、峰 2（染料木素）、峰 4（鷹嘴豆芽素

A）與 S 峰的相對保留時間，混合標準溶液中峰 1、峰 2、峰 4 相對保留時間的規(guī)定值分別

為 0.708、0.886、1.141。試樣溶液色譜圖中峰 1、峰 2、峰 4 相對保留時間與規(guī)定值的相

對偏差應(yīng)在±5％以內(nèi)。

圖 A.1 試樣溶液高效液相色譜圖

標引序號說明：

1——大豆苷元；

2——染料木素；

3——刺芒柄花素（S 峰）；

4——鷹嘴豆芽素 A。

圖 A.2 混合標準溶液高效液相色譜圖

標引序號說明：

1——大豆苷元；

2——染料木素；

3——刺芒柄花素（S 峰）；

4——鷹嘴豆芽素 A。

— 30 —

NYSL―1002―2023

附錄 B

（規(guī)范性）

刺芒柄花素和鷹嘴豆芽素 A 含量測定

B.1 原理

試樣中刺芒柄花素和鷹嘴豆芽素 A 經(jīng)甲醇提取后，用高效液相色譜儀測定，外標法定

量。

B.2 試劑或材料

B.2.1 乙腈：色譜純。

B.2.2 磷酸：分析純。

B.2.3 甲醇：色譜純。

B.2.4 磷酸溶液（0.1％）：取 1 mL 磷酸（B.2.2），用水定容至 1 L 容量瓶中，搖勻。

B.2.5 混合標準儲備溶液：分別稱取 80 mg（精確至 0.01 mg）刺芒柄花素標準品（CAS

號：485-72-3，純度不低于 98.0％）和 30 mg（精確至 0.01 mg）鷹嘴豆芽素 A 標準品（CAS

號：491-80-5，純度不低于 98.0％）于 50 mL 容量瓶中，用甲醇（B.2.3）溶解并定容，

搖勻，配制成刺芒柄花素和鷹嘴豆芽素 A 質(zhì)量濃度分別為 1.6 mg/mL 和 0.6 mg/mL 的混

合標準儲備溶液。

B.2.6 混合標準系列溶液：準確量取混合標準儲備溶液（B.2.5）適量，用甲醇（B.2.3）

稀釋，配制成刺芒柄花素質(zhì)量濃度分別為 0.02 mg/mL、0.04 mg/mL、0.08 mg/mL、0.16

mg/mL、0.32 mg/mL，鷹嘴豆芽素 A 質(zhì)量濃度分別為 0.0075 mg/mL、0.015 mg/mL、

0.03 mg/mL、0.06 mg/mL、0.12 mg/mL 的混合標準系列溶液。

B.2.7 微孔濾膜：0.45 μm，有機系。

B.3 儀器設(shè)備

B.3.1 高效液相色譜儀：配二極管陣列檢測器。

B.3.2 分析天平：精度為 0.01 mg。

B.3.3 超聲波清洗器。

B.4 試驗步驟

B.4.1 試樣溶液制備

平行做兩份試驗。稱取試樣 0.05 g（精確至 0.01 mg）于 50 mL 的容量瓶中，加入甲

醇（B.2.3）約 30 mL，超聲 30 min，冷卻至室溫后用甲醇（B.2.3）定容，搖勻，靜置后

取上清液，用微孔濾膜（B.2.7）過濾。

B.4.2 測定

B.4.2.1 液相色譜參考條件

液相色譜參考條件如下：

a）色譜柱：C18 柱，柱長為 250 mm，內(nèi)徑為 4.6 mm，粒徑為 5 μm，或性能相當(dāng)者；

b）流動相：A 相為乙腈（B.2.1），B 相為磷酸溶液（B.2.4）；梯度洗脫程序見表 B.1；

c）流速：0.8 mL/min；

d）柱溫：30 ℃；

e）檢測波長：260 nm；

f）進樣量：10 μL。

— 31 —

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表 B.1 梯度洗脫程序

時間（min） 流動相 A（％） 流動相 B（％）

0 15 85

20 45 55

30 75 25

31 90 10

35 90 10

36 15 85

40 15 85

B.4.2.2 混合標準溶液和試樣溶液測定

在儀器的最佳條件下，分別取混合標準系列溶液（B.2.6）和試樣溶液（B.4.1）進樣，

用高效液相色譜儀（B.3.1）測定。刺芒柄花素和鷹嘴豆芽素 A 標準溶液的液相色譜圖見圖

B.1。

B.4.2.3 定量

以混合標準系列溶液的濃度為橫坐標，色譜峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，其相關(guān)系

數(shù)應(yīng)不低于 0.99。試樣溶液中待測物的濃度應(yīng)在標準曲線的線性范圍內(nèi)。如超出范圍，應(yīng)

將試樣溶液用甲醇（B.2.3）稀釋后，重新測定。

B.5 試驗數(shù)據(jù)處理

試樣中刺芒柄花素或鷹嘴豆芽素 A 含量以質(zhì)量分數(shù)ωi計，數(shù)值以百分比（％）表示，

按式（B.1）計算：

100

1000

?

?

? ? m

? V

?? ....................................（B.1）

式中：

ρ——從標準曲線得到的試樣溶液中刺芒柄花素或鷹嘴豆芽素 A 的含量，單位為毫克每

毫升（mg/mL）；

V——試樣溶液定容體積，單位為毫升（mL）；

m——試樣質(zhì)量，單位為克（g）。

測定結(jié)果以平行測定的算術(shù)平均值表示，保留至小數(shù)點后 1 位。

B.6 精密度

在重復(fù)性條件下，兩次獨立測定結(jié)果與其算術(shù)平均值的絕對差值不大于該算術(shù)平均值的

5％。

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1

2

圖 B.1 刺芒柄花素（0.16 mg/mL）和鷹嘴豆芽素 A（0.06 mg/mL）標準溶液

高效液相色譜圖

標引序號說明：

1——刺芒柄花素；

2——鷹嘴豆芽素 A。

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附錄 C

（規(guī)范性）

正己烷和乙酸乙酯含量測定

C.1 原理

試樣中正己烷和乙酸乙酯經(jīng) N,N-二甲基甲酰胺提取，用氣相色譜儀測定，外標法定量。

C.2 試劑或材料

C.2.1 N,N-二甲基甲酰胺：色譜純。

C.2.2 標準儲備溶液：稱取 25 mg（精確至 0.01 mg）正己烷標準品（CAS 號：110-54-3，

純度不低于 99.5％）和 25 mg（精確至 0.01 mg）乙酸乙酯標準品（CAS 號：141-78-6，

純度不低于 99.0％），分別置于 25 mL 容量瓶中，用 N,N-二甲基甲酰胺（C.2.1）溶解并

定容，搖勻，配制成正己烷和乙酸乙酯質(zhì)量濃度均為 1.0 mg/mL 的標準儲備溶液。

C.2.3 標準系列溶液：準確量取正己烷和乙酸乙酯標準儲備溶液（C.2.2）適量，分別用

N,N-二甲基甲酰胺（C.2.1）稀釋，配制成正己烷和乙酸乙酯質(zhì)量濃度均為 0.0125 mg/mL、

0.025 mg/mL、0.05 mg/mL、0.10 mg/mL、0.20 mg/mL、0.40 mg/mL 的標準系列溶

液。

C.2.4 微孔濾膜：0.45 μm，有機系。

C.3 儀器設(shè)備

C.3.1 氣相色譜儀：配氫火焰離子化檢測器。

C.3.2 自動頂空進樣器。

C.3.3 頂空進樣瓶：20 mL。

C.3.4 分析天平：精度為 0.01 mg。

C.3.5 超聲波清洗器。

C.4 試驗步驟

C.4.1 試樣溶液制備

平行做兩份試樣。稱取試樣 1 g（精確至 0.01 mg），置于 10 mL 容量瓶中，用 N,N-二甲

基甲酰胺（C.2.1）溶解并定容，搖勻，微孔濾膜（C.2.4）過濾。

C.4.2 測定

C.4.2.1 氣相色譜參考條件

氣相色譜參考條件如下：

a）色譜柱：6％氰丙基苯基-94％二甲基聚硅氧烷的毛細管色譜柱，柱長為 30 m，內(nèi)徑

為 0.32 mm，膜厚為 1.8 μm，或性能相當(dāng)者；

b）柱溫：程序升溫，50 ℃保持 5 min，然后以 2 ℃/min 升溫至 56 ℃，再以 100 ℃/min

升溫至 190 ℃并保持 5 min；

c）自動頂空進樣器：頂空進樣瓶加熱溫度 80 ℃，定量環(huán)溫度 90 ℃，傳輸線溫度 100 ℃；

樣品加熱平衡時間 30 min，氣相平衡時間 0.2 min，定量環(huán) 1 mL；

d）進樣口溫度：200 ℃；

e）檢測器溫度：250 ℃；

f）載氣流速：氮氣 30 mL/min；氫氣 30 mL/min；空氣 300 mL/min；

g）分流比：5:1；

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NYSL―1002―2023

h）進樣體積：1.0 mL。

C.4.2.2 標準溶液和試樣溶液測定

在儀器的最佳條件下，分別取標準系列溶液（C.2.3）和試樣溶液（C.4.1）進樣，用

氣相色譜測定。正己烷和乙酸乙酯標準溶液的氣相色譜圖分別見圖 C.1 和圖 C.2。

C.4.2.3 定性

在相同試驗條件下，試樣溶液中正己烷或乙酸乙酯保留時間應(yīng)與標準系列溶液中正己烷

或乙酸乙酯（濃度相當(dāng)）的保留時間一致，其相對偏差在±2.5％之內(nèi)。

C.4.2.4 定量

以標準系列溶液的濃度為橫坐標，色譜峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，其相關(guān)系數(shù)應(yīng)

不低于 0.99。試樣溶液中待測物的濃度應(yīng)在標準曲線的線性范圍內(nèi)。如超出范圍，應(yīng)將試

樣溶液用 N,N-二甲基甲酰胺（C.2.1）稀釋后，重新測定。

C.5 試驗數(shù)據(jù)處理

試樣中正己烷或乙酸乙酯含量以質(zhì)量分數(shù)ωi計，數(shù)值以百分比（％）表示，按式（C.1）

計算：

100

1000

?

?

? ? m

? V

?? ································（C.1）

式中：

ρ——從標準曲線得到的試樣溶液中正己烷或乙酸乙酯的含量，單位為毫克每毫升

（mg/mL）；

V——試樣溶液定容體積，單位為毫升（mL）；

m——試樣質(zhì)量，單位為克（g）。

測定結(jié)果以平行測定的算術(shù)平均值表示，分別保留至小數(shù)點后 3 位（正己烷）和 1 位（乙

酸乙酯）。

C.6 精密度

在重復(fù)性條件下，兩次獨立測定結(jié)果與其算術(shù)平均值的絕對差值不大于該算術(shù)平均值的

5％。

圖 C.1 正己烷標準溶液（0.20 mg/mL）氣相色譜圖

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NYSL―1002―2023

圖 C.2 乙酸乙酯標準溶液（0.20 mg/mL）氣相色譜圖

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附錄 D

（規(guī)范性）

產(chǎn)品使用說明書

【新產(chǎn)品證書號】

【生產(chǎn)許可證號】

【產(chǎn)品批準文號】

【執(zhí)行標準】

飼料添加劑 紅三葉草提取物（有效成分為刺芒柄花素、鷹嘴豆芽素 A）

使用說明書

【產(chǎn)品名稱】紅三葉草提取物（有效成分為刺芒柄花素、鷹嘴豆芽素 A）

【英文名稱】Red Clover Extract (Active substances: Formononetin, Biochanin A)

【有效成分】刺芒柄花素（C16H12O4）和鷹嘴豆芽素 A（C16H12O5）

【性狀】棕綠色粉末，氣微，味略苦。

【產(chǎn)品成分分析保證值】

項 目 指 標

刺芒柄花素/% ≥15.0

鷹嘴豆芽素 A/% ≥5.0

粒度（0.25 mm 孔徑試驗篩通過率）/% ≥90

水分/% ≤5.0

灼燒殘渣/% ≤10.0

總砷（以 As 計）/（mg/kg） ≤2.0

鉛（Pb）/（mg/kg） ≤2.0

正己烷/% ≤0.029

乙酸乙酯/% ≤0.5

【作用功效】抑制瘤胃氨氮釋放速度，提高氮利用率。

【適用范圍】育成期奶牛和成年奶牛。

【用法與用量】在添加尿素等非蛋白氮的育成期奶牛和成年奶牛全混合日糧中推薦添加量為

0.4~0.8 g/kg（以刺芒柄花素與鷹嘴豆芽素 A 之和計）。

【凈含量】

【保質(zhì)期】24 個月。

【貯 運】貯存于通風(fēng)、干燥處，防止日曬、防雨淋，遠離火源，禁止與有毒有害物質(zhì)混貯混運。

【生產(chǎn)企業(yè)】

生產(chǎn)地址 郵編

電話 傳真

網(wǎng)址 郵箱

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NYSL―1002―2023

附錄 E

（規(guī)范性）

產(chǎn)品標簽

【新產(chǎn)品證書號】 【生產(chǎn)許可證號】

【產(chǎn)品批準文號】 【執(zhí)行標準】

飼料添加劑 紅三葉草提取物（有效成分為刺芒柄花素、鷹嘴豆芽素 A）

Red Clover Extract (Active substances: Formononetin, Biochanin A)

【產(chǎn)品名稱】紅三葉草提取物（有效成分為刺芒柄花素、鷹嘴豆芽素 A）

【產(chǎn)品成分分析保證值】

項 目 指 標

刺芒柄花素/% ≥15.0

鷹嘴豆芽素 A/% ≥5.0

粒度（0.25 mm 孔徑試驗篩通過率）/% ≥90

水分/% ≤5.0

灼燒殘渣/% ≤10.0

總砷（以 As 計）/（mg/kg） ≤2.0

鉛（Pb）/（mg/kg） ≤2.0

正己烷/% ≤0.029

乙酸乙酯/% ≤0.5

【有效成分】刺芒柄花素（C16H12O4）和鷹嘴豆芽素 A（C16H12O5）

【作用功效】抑制瘤胃氨氮釋放速度，提高氮利用率。

【適用范圍】育成期奶牛和成年奶牛。

【用法與用量】在添加尿素等非蛋白氮的育成期奶牛和成年奶牛全混合日糧中推薦添加量為

0.4~0.8 g/kg（以刺芒柄花素與鷹嘴豆芽素 A 之和計）。

【凈含量】

【保質(zhì)期】24 個月。

【貯 運】貯存于通風(fēng)、干燥處，防止日曬、防雨淋，遠離火源，禁止與有毒有害物質(zhì)混貯混運。

【生產(chǎn)企業(yè)】

生產(chǎn)地址 郵編

電話 傳真

【生產(chǎn)日期】

【生產(chǎn)批號】

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產(chǎn)品咨詢：zhaoshengguo@caas.cn

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