企業(yè)月刊

Health

上海伯杰醫(yī)療科技股份有限公司

8月 第一期

目錄

C O N T E N T S

免疫學(xué)知識

公司員工生活簡要

現(xiàn)公司研究項(xiàng)目與進(jìn)度

娛樂、休閑

免疫學(xué)知識

原理：

免疫層析法(immunochromatography)是

近幾年來國外興起的一種快速診斷技術(shù)，其

原理是將特異的抗體先固定于硝酸纖維素膜

的某一區(qū)帶，當(dāng)該干燥的硝酸纖維素一端浸

入樣品（尿液或血清）后，由于毛細(xì)管作用，

樣品將沿著該膜向前移動，當(dāng)移動至固定有

抗體的區(qū)域時，樣品中相應(yīng)的抗原即與該抗

體發(fā)生特異性結(jié)合，若用免疫膠體金或免疫

酶染色可使該區(qū)域顯示一定的顏色，從而實(shí)

現(xiàn)特異性的免疫診斷。

免疫層析技術(shù)是建立在層析技術(shù)和抗原一抗

體特異性免疫反應(yīng)基礎(chǔ)上的一項(xiàng)新興免疫檢

測技術(shù)。

免疫層析技術(shù)

免疫層析技術(shù)以固定有檢測線和控制線的條狀纖維

層析材料為固定相，測試液為流動相，通過毛細(xì)管

作用使待測物在層析條上移動。

待測物在T線處發(fā)生特異性免疫反應(yīng)。游離物在C線

處發(fā)生免疫反應(yīng)。

應(yīng)用：

免疫層析檢測技術(shù)可以應(yīng)用于各種傳染

病、早期癌癥、性病、艾滋病、早早孕、

排卵、胎兒畸形早期檢測等許多臨床檢

測項(xiàng)目。在對臨床測定的樣品要求、檢

測時間、儀器設(shè)備、人員要求、測試費(fèi)

用、安全性等諸多方面具有一般常規(guī)方

法所不可比擬的優(yōu)點(diǎn)。

免疫層析技術(shù)的應(yīng)用

1：用候選抗體檢測賦值樣本時靈敏度低。

解決方法:⑴ 此項(xiàng)目臨床上測定區(qū)間多少，如果靈敏度較高可以考慮稀釋一定倍數(shù)再測定。

⑵線性上不去很有可能是標(biāo)記抗體和包被抗體的用量不合適，理論上用量不足，但實(shí)際應(yīng)用時并不一定，

建議對標(biāo)記抗體和包被抗體設(shè)置梯度進(jìn)行調(diào)試。

⑶換用小粒徑的標(biāo)記物，小粒徑的標(biāo)記物比表面積大，結(jié)合的抗體量更多。

⑷ 抗體親和性不佳，更換原料。

2：用候選抗體檢測樣本時高值樣本線性上不去。

解決方法:⑴此項(xiàng)目臨床上測定區(qū)間多少，如果靈敏度較高可以考慮稀釋一定倍數(shù)再測定。

⑵線性上不去很有可能是標(biāo)記抗體和包被抗體的用量不合適，理論上用量不足，但實(shí)際應(yīng)用時并不一定，

建議對標(biāo)記抗體和包被抗體設(shè)置梯度進(jìn)行調(diào)試。

⑶換用小粒徑的標(biāo)記物，小粒徑的標(biāo)記物比表面積大，結(jié)合的抗體量更多。

⑷ 抗體親和性不佳，更換原料。

免疫層析技術(shù)面臨的問題與解決方法

免疫層析技術(shù)面臨的問題與解決方法

3：用候選抗體檢測已賦值的臨床樣本，相關(guān)性指標(biāo)較差。

解決方法：

⑴樣本來源及賦值數(shù)據(jù)是否可靠？樣本是否新鮮？有條件的話可以用對照試劑盒對樣本進(jìn)行檢測，以確

定樣本的實(shí)際數(shù)值是否發(fā)生改變。

⑵ 樣本中存在干擾成分，需篩選合適的阻斷劑。

⑶ 試劑本身重復(fù)性較差，需重新優(yōu)化工藝。

4：標(biāo)記好的抗體，封閉完了放在儲存液里，一兩天后有沉淀。

解決方法：

膠體金或是熒光微球標(biāo)記后的抗體時間久了出現(xiàn)輕微沉淀很正常，渦旋或是水浴超聲沉淀即可消失。如

果出現(xiàn)結(jié)塊沉淀，超聲后仍無法去除，則可能存在以下問題：

⑴ 標(biāo)記體系中PH值不合適，導(dǎo)致在標(biāo)記時就出現(xiàn)聚沉現(xiàn)象，設(shè)置PH梯度或更換緩沖體系進(jìn)行調(diào)試。

⑵ 封閉劑的成分或是用量不合適，導(dǎo)致金顆?；蚴俏⑶虮砻嬗新懵段稽c(diǎn)，在儲存時出現(xiàn)交聯(lián)聚集；調(diào)

整封閉劑用量或更換封閉劑（廠家、種類）再測試。

⑶儲存液不合適，導(dǎo)致偶聯(lián)的復(fù)合物不穩(wěn)定，出現(xiàn)解離，需重新配制儲存液。

免疫層析技術(shù)面臨的問題與解決方法

5：為了提升試紙條檢測靈敏度，T線提升了包被用量，但是信號并沒有增加。

解決方法：

NC膜是空間立體結(jié)構(gòu)，結(jié)合蛋白的數(shù)量是有限的，超過上限后多余的蛋白沒有結(jié)合或結(jié)

合的蛋白不牢固，甚至?xí)斐傻鞍椎亩逊e，形成空間位阻效應(yīng)，致使檢測時信號不再增

加甚至降低。在調(diào)整工藝時，需要根據(jù)測試結(jié)果選擇合適的包被用量。

6：陰性組用樣本稀釋液進(jìn)行測試，T線出現(xiàn)假陽性的原因。

解決方法：

這種假陽是由于標(biāo)記物和包被的蛋白非特異性結(jié)合造成的，項(xiàng)目中很常見，可從以下幾

個方面解決：

⑴ 在標(biāo)記時更換封閉劑成分或是增加用量。

⑵ 在不影響試劑靈敏度的情況下，降低標(biāo)記和包被抗體的用量，或在樣品墊中添加封閉

劑進(jìn)行流動封閉，將整體信號壓下來，來消除這種本底信號。

⑶ 增加離子濃度或更換稀釋液，改用其他體系進(jìn)行嘗試。

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