企業(yè)月刊

Health

上海伯杰醫(yī)療科技股份有限公司

8月 第一期

目錄

C O N T E N T S

免疫學(xué)知識(shí)

公司員工生活簡(jiǎn)要

現(xiàn)公司研究項(xiàng)目與進(jìn)度

娛樂(lè)、休閑

免疫學(xué)知識(shí)

原理：

免疫層析法(immunochromatography)是

近幾年來(lái)國(guó)外興起的一種快速診斷技術(shù)，其

原理是將特異的抗體先固定于硝酸纖維素膜

的某一區(qū)帶，當(dāng)該干燥的硝酸纖維素一端浸

入樣品（尿液或血清）后，由于毛細(xì)管作用，

樣品將沿著該膜向前移動(dòng)，當(dāng)移動(dòng)至固定有

抗體的區(qū)域時(shí)，樣品中相應(yīng)的抗原即與該抗

體發(fā)生特異性結(jié)合，若用免疫膠體金或免疫

酶染色可使該區(qū)域顯示一定的顏色，從而實(shí)

現(xiàn)特異性的免疫診斷。

免疫層析技術(shù)是建立在層析技術(shù)和抗原一抗

體特異性免疫反應(yīng)基礎(chǔ)上的一項(xiàng)新興免疫檢

測(cè)技術(shù)。

免疫層析技術(shù)

免疫層析技術(shù)以固定有檢測(cè)線(xiàn)和控制線(xiàn)的條狀纖維

層析材料為固定相，測(cè)試液為流動(dòng)相，通過(guò)毛細(xì)管

作用使待測(cè)物在層析條上移動(dòng)。

待測(cè)物在T線(xiàn)處發(fā)生特異性免疫反應(yīng)。游離物在C線(xiàn)

處發(fā)生免疫反應(yīng)。

應(yīng)用：

免疫層析檢測(cè)技術(shù)可以應(yīng)用于各種傳染

病、早期癌癥、性病、艾滋病、早早孕、

排卵、胎兒畸形早期檢測(cè)等許多臨床檢

測(cè)項(xiàng)目。在對(duì)臨床測(cè)定的樣品要求、檢

測(cè)時(shí)間、儀器設(shè)備、人員要求、測(cè)試費(fèi)

用、安全性等諸多方面具有一般常規(guī)方

法所不可比擬的優(yōu)點(diǎn)。

免疫層析技術(shù)的應(yīng)用

1：用候選抗體檢測(cè)賦值樣本時(shí)靈敏度低。

解決方法:⑴ 此項(xiàng)目臨床上測(cè)定區(qū)間多少，如果靈敏度較高可以考慮稀釋一定倍數(shù)再測(cè)定。

⑵線(xiàn)性上不去很有可能是標(biāo)記抗體和包被抗體的用量不合適，理論上用量不足，但實(shí)際應(yīng)用時(shí)并不一定，

建議對(duì)標(biāo)記抗體和包被抗體設(shè)置梯度進(jìn)行調(diào)試。

⑶換用小粒徑的標(biāo)記物，小粒徑的標(biāo)記物比表面積大，結(jié)合的抗體量更多。

⑷ 抗體親和性不佳，更換原料。

2：用候選抗體檢測(cè)樣本時(shí)高值樣本線(xiàn)性上不去。

解決方法:⑴此項(xiàng)目臨床上測(cè)定區(qū)間多少，如果靈敏度較高可以考慮稀釋一定倍數(shù)再測(cè)定。

⑵線(xiàn)性上不去很有可能是標(biāo)記抗體和包被抗體的用量不合適，理論上用量不足，但實(shí)際應(yīng)用時(shí)并不一定，

建議對(duì)標(biāo)記抗體和包被抗體設(shè)置梯度進(jìn)行調(diào)試。

⑶換用小粒徑的標(biāo)記物，小粒徑的標(biāo)記物比表面積大，結(jié)合的抗體量更多。

⑷ 抗體親和性不佳，更換原料。

免疫層析技術(shù)面臨的問(wèn)題與解決方法

免疫層析技術(shù)面臨的問(wèn)題與解決方法

3：用候選抗體檢測(cè)已賦值的臨床樣本，相關(guān)性指標(biāo)較差。

解決方法：

⑴樣本來(lái)源及賦值數(shù)據(jù)是否可靠？樣本是否新鮮？有條件的話(huà)可以用對(duì)照試劑盒對(duì)樣本進(jìn)行檢測(cè)，以確

定樣本的實(shí)際數(shù)值是否發(fā)生改變。

⑵ 樣本中存在干擾成分，需篩選合適的阻斷劑。

⑶ 試劑本身重復(fù)性較差，需重新優(yōu)化工藝。

4：標(biāo)記好的抗體，封閉完了放在儲(chǔ)存液里，一兩天后有沉淀。

解決方法：

膠體金或是熒光微球標(biāo)記后的抗體時(shí)間久了出現(xiàn)輕微沉淀很正常，渦旋或是水浴超聲沉淀即可消失。如

果出現(xiàn)結(jié)塊沉淀，超聲后仍無(wú)法去除，則可能存在以下問(wèn)題：

⑴ 標(biāo)記體系中PH值不合適，導(dǎo)致在標(biāo)記時(shí)就出現(xiàn)聚沉現(xiàn)象，設(shè)置PH梯度或更換緩沖體系進(jìn)行調(diào)試。

⑵ 封閉劑的成分或是用量不合適，導(dǎo)致金顆粒或是微球表面有裸露位點(diǎn)，在儲(chǔ)存時(shí)出現(xiàn)交聯(lián)聚集；調(diào)

整封閉劑用量或更換封閉劑（廠(chǎng)家、種類(lèi)）再測(cè)試。

⑶儲(chǔ)存液不合適，導(dǎo)致偶聯(lián)的復(fù)合物不穩(wěn)定，出現(xiàn)解離，需重新配制儲(chǔ)存液。

免疫層析技術(shù)面臨的問(wèn)題與解決方法

5：為了提升試紙條檢測(cè)靈敏度，T線(xiàn)提升了包被用量，但是信號(hào)并沒(méi)有增加。

解決方法：

NC膜是空間立體結(jié)構(gòu)，結(jié)合蛋白的數(shù)量是有限的，超過(guò)上限后多余的蛋白沒(méi)有結(jié)合或結(jié)

合的蛋白不牢固，甚至?xí)斐傻鞍椎亩逊e，形成空間位阻效應(yīng)，致使檢測(cè)時(shí)信號(hào)不再增

加甚至降低。在調(diào)整工藝時(shí)，需要根據(jù)測(cè)試結(jié)果選擇合適的包被用量。

6：陰性組用樣本稀釋液進(jìn)行測(cè)試，T線(xiàn)出現(xiàn)假陽(yáng)性的原因。

解決方法：

這種假陽(yáng)是由于標(biāo)記物和包被的蛋白非特異性結(jié)合造成的，項(xiàng)目中很常見(jiàn)，可從以下幾

個(gè)方面解決：

⑴ 在標(biāo)記時(shí)更換封閉劑成分或是增加用量。

⑵ 在不影響試劑靈敏度的情況下，降低標(biāo)記和包被抗體的用量，或在樣品墊中添加封閉

劑進(jìn)行流動(dòng)封閉，將整體信號(hào)壓下來(lái)，來(lái)消除這種本底信號(hào)。

⑶ 增加離子濃度或更換稀釋液，改用其他體系進(jìn)行嘗試。

全心全意真誠(chéng)服務(wù)

可持續(xù)的健康發(fā)展及運(yùn)營(yíng)